Étoposide 95

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Topoisomérase II · étoposide Interactions diriger la formation de Drug-induced Enzyme-ADN Décolleté Complexes * Le § D. Andrew Burden. Paul S. Kingma ‡. ¶ Le Stacie J. Froelich-Ammon. Mary-Ann Bjornsti ∥. Marcia W. Patchan **. Richard B. Thompson ** et Neil Osheroff ‡ ‡‡ §§ Des départements de Biochimie ‡ ‡‡ Medicine, School of Medicine, Nashville, Tennessee 37232-0146 Vanderbilt University ∥ Département de biochimie et de biologie moléculaire, Université Thomas Jefferson, Philadelphie, Pennsylvanie 19107 ** Département de chimie biologique, Université du Maryland School of Medicine, Baltimore, Maryland 21201-1503 §§ A qui la correspondance doit être adressée: Département de biochimie, 654 Medical Research Bldg I, School of Medicine, Nashville, TN 37232-0146 Université Vanderbilt. Tél. 615-322-4338; Fax: 615-343-1166; E-mail: osheron ctrvax. vanderbilt. edu. ↵ ¶ Adresse actuelle: Département de chimie et de biochimie, Université du Colorado, Boulder, CO 80309-0215. Abstrait Topoisomérase II est la cible de plusieurs médicaments anticancéreux très actifs qui induisent la mort cellulaire en améliorant l'ADN de scission enzymatique à médiation. Bien que ces agents augmentent considérablement les niveaux de clivage d'acide nucléique d'une manière spécifique d'un site, on comprend mal en ce qui concerne le mécanisme par lequel ils modifient le site de l'ADN sélectivité de la topoisomérase II. Par conséquent, une série d'expériences de cinétique et de liaison ont été effectuées pour déterminer le mécanisme de base par lequel le médicament anti-cancéreux, l'étoposide, améliore la formation d'un complexe de clivage à 22 séquences d'acides nucléiques spécifiques. En général, les niveaux maximaux d'ADN scission (à savoir C max) varie considérablement sur une gamme plus large que ne l'affinité apparente de l'étoposide (à savoir K m) pour ces sites, et il n'y avait pas de corrélation entre ces deux paramètres cinétiques. En outre, l'enzyme · la liaison des médicaments et l'ordre d'addition des expériences ont indiqué que l'étoposide et la topoisomérase II forment un complexe cinétiquement compétente en l'absence d'ADN. Ces résultats suggèrent que l'étoposide · topoisomérase II (plutôt que étoposide · ADN) interactions médiate clivage formation complexe. Enfin, les taux de ligation à des sites spécifiques en corrélation inverse avec les valeurs de Cmax, ce qui indique que les niveaux maximaux de scission induite par l'étoposide reflètent la capacité du médicament à inhiber la religature à des séquences spécifiques, plutôt que l'affinité du médicament pour une enzyme ADN spécifique d'un site complexes. Notes ↵ § Stagiaire dans National Institutes of Health Grant 5 T32 CA09582. ↵ * Ce travail a été soutenu par les National Institutes of Health Grants GM33944 (N. O.) et CA58755 (à M.-A. B.) et par l'Office of Naval Research contrat N00014-91-J-1572 (à R. B. T.). Les frais de publication de cet article ont été défrayés en partie par le paiement des frais de page. L'article doit donc être présente la mention «publicité» en conformité avec 18 U. S.C. Section 1734 uniquement pour indiquer ce fait. Reçu 5 Août 1996. © 1996 par The American Society for Biochemistry and Molecular Biology, Inc.